發(fā)布日期：2018-03-15
世界衛(wèi)生組織（WHO）預(yù)測，2040年神經(jīng)退行性疾病將取代癌癥成為人類第二大致死疾病。至今為止還沒有任何針對這類疾病的有效治療方案，因此了解這類疾病的致病機理尤為迫切。包括阿茲海默癥（Alzheimer’s disease）、帕金森（Parkinson’s disease）、亨廷頓（Huntington’s disease）、以及肌萎縮側(cè)索硬化癥（ALS）在內(nèi)的很多神經(jīng)退行性疾病都具有一系列共同特征，那就是基因突變和個體衰老所引起的環(huán)境壓力最終導(dǎo)致的蛋白聚集?；诖耍P(guān)于疾病發(fā)生的機制有兩個假說：蛋白聚集物本身帶來的獲得性毒性機制（gain of toxic function）和基因突變導(dǎo)致的關(guān)鍵蛋白功能缺失性細(xì)胞毒性（loss of critical physiological function）(Winklhofer et al., 2008)。
近期，來自德國馬普生物化學(xué)研究所Baumeister教授組分別與德國神經(jīng)退行性疾病研究中心Edbauer教授組和Ulm大學(xué)Kochanek教授組合作，由郭強博士主要完成的工作一個月內(nèi)在Cell和Nature雜志上相繼發(fā)表了題為“In Situ Structure of Neuronal C9orf72 Poly-GA Aggregates Reveals Proteasome Recruitment”和“The cryo-electron microscopy structure of huntingtin”的文章，利用冷凍電子斷層掃描技術(shù)和單顆粒三維重構(gòu)技術(shù)分別解析了細(xì)胞原位的蛋白聚集物及其微環(huán)境的結(jié)構(gòu)以及人源huntingtin蛋白的結(jié)構(gòu)，為了解神經(jīng)退行性疾病的發(fā)病機制提供了新思路。
第一篇
2月8日發(fā)表于Cell雜志的題為“In Situ Structure of Neuronal C9orf72 Poly-GA Aggregates Reveals Proteasome Recruitment”的研究論文 (Guo et al., 2018a)，在大鼠神經(jīng)細(xì)胞原位解析了一種重復(fù)短肽（poly-GA）聚集的結(jié)構(gòu)，為疾病發(fā)生中的“獲得性毒性機制”假說提供了有利的支撐。
研究認(rèn)為，C9orf72基因的多拷貝突變是導(dǎo)致肌萎縮側(cè)索硬化癥（ALS）和額顳葉癡呆（FTD）的最主要遺傳因素。該多拷貝序列在病理狀態(tài)下會被翻譯為五種不同的重復(fù)短肽，繼而形成蛋白聚集。該研究工作選用其中最為常見的一種重復(fù)短肽（poly-GA）為研究對象，在大鼠神經(jīng)細(xì)胞原位解析了該蛋白聚集的結(jié)構(gòu)。研究者發(fā)現(xiàn)，不同于已經(jīng)報道的Tau、A-beta、Huntingtin等神經(jīng)退行性疾病相關(guān)蛋白形成的螺旋纖維狀結(jié)構(gòu)，該蛋白是在細(xì)胞內(nèi)形成了寬度長短不一的絲帶狀結(jié)構(gòu)。
此外，該蛋白聚集物大量募集了蛋白酶體，導(dǎo)致蛋白聚集物區(qū)域的蛋白酶體濃度高達(dá)正常濃度的30倍，而其他生物大分子，如核糖體和分子伴侶卻被排除在聚集物外部。進(jìn)一步的冷凍電鏡結(jié)構(gòu)分析表明，雖然濃度增加，但與蛋白聚集物的接觸導(dǎo)致大量蛋白酶體處于失活狀態(tài)。結(jié)果，細(xì)胞在整體水平上的蛋白酶體表達(dá)量并沒有變化，而有功能的蛋白酶體的數(shù)量大幅減少，這可能就是蛋白聚集引起細(xì)胞毒性的原因。
值得一提的是，在冷凍電鏡技術(shù)層面上，該研究通過使用多種成像技術(shù)，首次實現(xiàn)了從光學(xué)顯微鏡的微米水平到一納米左右分辨率電子密度圖的多尺度樣品追蹤成像。
第二篇
3月1日發(fā)表于Nature的題為” The cryo-electron microscopy structure of huntingtin” 的研究論文(Guo et al., 2018b)，報道了人源huntingtin蛋白的冷凍電鏡結(jié)構(gòu)，該研究有助于幫助人類了解亨廷頓舞蹈癥的關(guān)鍵蛋白huntingtin的生理功能。
亨廷頓舞蹈癥是由huntingtin基因突變引起的常染色體顯性遺傳的神經(jīng)退行性疾病。盡管該疾病的致病基因在25年前就被確定，但該蛋白的結(jié)構(gòu)及其確切功能至今依然未知。該研究中，研究者發(fā)現(xiàn)huntingtin結(jié)合蛋白HAP40可以穩(wěn)定Huntingtin的三個結(jié)構(gòu)域，這使得高分辨結(jié)構(gòu)的解析成為可能。最終，研究者首次獲得了該蛋白的原子分辨率結(jié)構(gòu)。
Huntingtin-HAP40復(fù)合物結(jié)構(gòu)（圖片制作：Gabriele Stautener，ARTIFOX）
目前治療亨廷頓舞蹈癥最有潛力的方案是采用沉默Huntingtin基因的方式，即通過反義多聚核苷酸靶向該基因的mRNA，繼而通過降解mRNA達(dá)到基因沉默的目的。但是這一方法的弊端在于無法區(qū)分突變的huntingtin基因和正常huntingtin基因。因此，進(jìn)一步了解huntingtin蛋白的功能對于優(yōu)化這一治療方案，或研發(fā)新的治療方案，有著重要而深遠(yuǎn)的意義。
郭強博士是Cell和Nature兩篇論文的共同第一作者，這兩項工作先后也受到A LZFORUM 、ScienceDaily 以及馬普學(xué)會的報道與關(guān)注。來自芝加哥西北大學(xué)的神經(jīng)生物學(xué)家Teepu Siddique認(rèn)為關(guān)于肌萎縮側(cè)索硬化癥（ALS）的這項工作非常重要，因為過去該領(lǐng)域沒有得到足夠的重視。而來自臺北“中研院”的同行Yun-Ru (Ruby) Chen表示，上述研究將會在相關(guān)領(lǐng)域產(chǎn)生重大影響。
參考文獻(xiàn)和資料：
1. Guo, Q., Lehmer, C., Martínez-Sánchez, A., Rudack, T., Beck, F., Hartmann, H., Pérez-Berlanga, M., Frottin, F., Hipp, M.S., Hartl, F.U., et al. (2018a). In Situ Structure of Neuronal C9orf72 Poly-GA Aggregates Reveals Proteasome Recruitment. Cell 172, 696–705.e12.
2. Guo, Q., Bin Huang, Cheng, J., Seefelder, M., Engler, T., Pfeifer, G., Oeckl, P., Otto, M., Moser, F., Maurer, M., et al. (2018b). The cryo-electron microscopy structure of huntingtin. Nature 555, 117–120.
3. Winklhofer, K.F., Tatzelt, J., and Haass, C. (2008). The two faces of protein misfolding: gain- and loss-of-function in neurodegenerative diseases. EMBO J. 27, 336–349.
4. https://www.alzforum.org/news/research-news/are-als-dipeptide-repeat-ribbons-entangling-proteasomes
來源：BioArt
